凝膠遷移或電泳遷移率實(shí)驗(yàn)(EMSA-electrophoretic mobility shift assay)是一種研究DNA結(jié)合蛋白和其相關(guān)的DNA結(jié)合序列相互作用的技術(shù),可用于研究DNA結(jié)合蛋白和其相關(guān)的DNA結(jié)合序列相互作用、DNA定性和定量分析。
原理
EMSA原理示意圖
EMSA主要基于蛋白-探針復(fù)合物在在凝膠電泳過程中遷移較慢的原理。根據(jù)實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)特異性和非特異性探針,當(dāng)核酸探針與樣本蛋白混合孵育時(shí),樣本中可以與核酸探針結(jié)合的蛋白質(zhì)與探針形成蛋白-探針復(fù)合物;這種復(fù)合物由于分子量大,在進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳時(shí)遷移較慢,而沒有結(jié)合蛋白的探針則較快;孵育的樣本在進(jìn)行聚丙烯酰胺凝膠電泳并轉(zhuǎn)膜后,蛋白-探針復(fù)合物會(huì)在膜靠前的位置形成一條帶,說(shuō)明有蛋白與目標(biāo)探針發(fā)送互作。
客戶提供
1、樣本:細(xì)胞,1*107以上 ;組織:≥0.2g;
2、基因信息(ID號(hào)),預(yù)測(cè)的結(jié)合位點(diǎn),或者探針
3、靶蛋白的一抗
美軒提供
1、電泳結(jié)果
2、實(shí)驗(yàn)報(bào)告
EMSA實(shí)驗(yàn)結(jié)果