RIP技術(shù)(RNA Binding Protein Immunoprecipitation Assay,RNA結(jié)合蛋白免疫沉淀),是研究細(xì)胞內(nèi)RNA與蛋白結(jié)合情況的技術(shù),是了解轉(zhuǎn)錄后調(diào)控網(wǎng)絡(luò)動(dòng)態(tài)過(guò)程的有力工具,幫助我們發(fā)現(xiàn)與目的蛋白相互作用的miRNA,lncRNA或mRNA。
原理
RIP原理示意圖
樣本先在非變性條件下,使用蛋白裂解液處理,這樣完整細(xì)胞內(nèi)存在的蛋白質(zhì)-RNA復(fù)合體被保留下來(lái),再針對(duì)目標(biāo)蛋白的抗體把相應(yīng)的RNA-蛋白復(fù)合物沉淀下來(lái),然后經(jīng)過(guò)分離純化就可以對(duì)結(jié)合在復(fù)合物上的RNA進(jìn)行qPCR或高通量測(cè)序分析。
客戶提供
1、樣本:細(xì)胞,≥1*107;組織:≥0.5g,干冰運(yùn)輸;
2、一抗:要求IP級(jí)別的抗體
3、若研究已知靶基因,提供基因的信息(ID號(hào))和預(yù)測(cè)位點(diǎn)。
美軒提供
1、已知靶基因:電泳圖或溶解曲線
未知靶基因:數(shù)據(jù)包和分析結(jié)果
2、實(shí)驗(yàn)報(bào)告