RNA pull-down是檢測RNA結合蛋白與其靶RNA之間相互作用的主要實驗手段之一,主要應用于發現miRNA,lncRNA或mRNA的調節靶點,是研究miRNA或lncRNA的利器之一。
原理
RNA pull down 原理示意圖
使用體外轉錄法標記生物素RNA探針,然后與胞漿蛋白提取液孵育,形成RNA-蛋白質復合物。該復合物可與鏈霉親和素標記的磁珠結合,從而與孵育液中的其他成分分離。復合物洗脫后,通過western blot實驗或MS檢測與RNA相互作用的蛋白。
客戶提供
1、樣本:細胞,≥1*107;組織,≥0.5g,干冰運輸;
2、目的基因信息(ID號)
3、若研究已知靶蛋白,提供靶蛋白信息和靶蛋白的一抗。
美軒提供
1、基因合成測序報告,構建含目的基因的質粒、測序報告等
2、探針序列
3、Western Blot結果或質譜圖及蛋白質比對結果