叫做蛋白質體外結合實驗,是體外驗證/尋找互作蛋白的技術,在體外條件下檢測蛋白質與蛋白質之間相互作用的方法。通過SDS-page電泳分析,或結合WB和MS檢測,可驗證蛋白間的相互作用或篩選獲取相應的目的蛋白,因此適用范圍廣。
主要應用
1、驗證兩個已知蛋白的相互作用
2、篩選與已知蛋白相互作用的未知蛋白
3、研究兩個已知蛋白相互作用位點
原理
GST pull down原理示意圖
利用重組技術將探針蛋白與GST(Glutathione S transferase)融合,融合蛋白通過GST與固相化在載體上的GTH(Glutathione)親和結合。因此,當與融合蛋白有相互作用的蛋白通過層析柱時或與此固相復合物混合時就可被吸附而分離。
客戶提供
1、若是驗證兩種蛋白質間相互作用,需提供誘餌蛋白質及捕獲蛋白質表達載體;若是驗證目的蛋白與細胞裂解物蛋白互作,捕獲蛋白質表達載體和含有誘餌蛋白的細胞裂解上清或者其它。若無,提供目的蛋白信息,由我公司負責構建表達載體,
2、若是驗證兩種蛋白質間相互作用,需提供捕獲蛋白一抗。
美軒提供
1、SDS-PAGE、western blot結果或質譜分析
2、實驗報告